《表1 各基因引物序列：低氧和缺氧诱导因子-1α对人白血病细胞株K562细胞血管相关生成因子的影响》

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《低氧和缺氧诱导因子-1α对人白血病细胞株K562细胞血管相关生成因子的影响》

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收集处理后的K562细胞，每1×106细胞加入1mL Trizol反复吹打至细胞完全裂解，提取细胞总RNA。核酸蛋白测定仪测定光密度（OD）260/OD280的比值，并进行RNA样品的纯度与浓度测定。RNA纯度和浓度合格者将RNA反转录制备cDNA，逆转录体系为40.0μL即Total RNA sample 10.0μL，4×dNTP 2.5μL，Oligo dT primer 2.0μL，5×Buffer 8.0μL，焦碳酸二乙酯（DEPC）H2O 14.5μL，RNase Inhibition 1.0μL和M-MLV 2.0μL。ABI7500PCR检测仪检测mRNA表达，反应体系为20.0μL，即cDNA 2.0μL，10×Buffer 2.5μL，PCR Primer 2.0μL，dNTP 2.0μL，Premix Taq 0.5μL和ddH2O 11.0μL。扩增条件:预变性95℃10min，变性95℃15s，退火60℃60s，共进行40个循环。设置甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）基因作为内参。应用Primer5.0软件设计引物。引物序列见表1。