《表1 检测基因引物序列:矮壮素对小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1骨骼发育相关基因及蛋白的影响及其机制》

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《矮壮素对小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1骨骼发育相关基因及蛋白的影响及其机制》


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PCR基因引物由奥科生物公司合成,结果见表1。以0μg/m L矮壮素作为对照组,8、40、200、1 000μg/m L矮壮素染毒48 h后经消化处理,收集细胞,酚氯仿法提取总RNA,验证总RNA完整性,使用Nano-drop2000测定总RNA样品纯度和浓度。利用逆转录试剂盒(Prime-ScriptTM RT-PCR Kit)以Oligo d T为引物将1μg RNA逆转录为c DNA。Real-Time PCR按照SYBR Premix Ex TaqT\n\t\t\t\t\t\tM试剂盒说明书进行操作。以GAPDH为内参,采用2-△△CT计算各基因的m RNA相对表达量。