《表1 引物序列表:活化型TGFβRI(T204D)转基因小鼠的建立及其对牙釉质发育影响的初步研究》

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《活化型TGFβRI(T204D)转基因小鼠的建立及其对牙釉质发育影响的初步研究》


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小鼠成釉细胞系(ALC,日本秋田大学Sugiyama教授惠赠)。实验用小鼠为C57BL/6小鼠,由赛业(广州)生物科技有限公司提供。RNAiso Plus、反转录酶、Oligo(dT)18Primer、dNTP Mixture、RNase inhibitor、高保真酶、T4DNA连接酶、蛋白酶K及pMD18-T simple载体(TaKaRa公司,中国);MluI、XhoI、XbaI、KpnI、SpeⅠ、NotI、pPB[Exp]载体及琼脂糖(Promega公司,美国);GeneRuler TM 1kb DNA Ladder,GeneRuler TM100bp DNA Ladder(Fermentas公司,美国);GatewayTMBP ClonaseTMII Enzyme Mix,GatewayTMLR ClonaseTMII Plus Enzyme Mix(Invitrogen公司,美国);Taq DNA聚合酶、基因组总DNA提取试剂盒、小量质粒提取试剂盒(天根生化科技有限公司);中量质粒提取试剂盒和QIAquick Gel Extraction Kit(QIAGEN公司,美国);胎牛血清、胰蛋白酶、DMEM培养基、PBS(Hyclone公司,美国);大肠杆菌DH5a感受态细胞由本实验室制备。大肠杆菌Stbl3感受态细胞,质粒PUP-MCS和pDONR221等均由赛业(广州)生物科技有限公司制备。PCR仪(Bio-Rad公司,美国)。基因克隆及突变体构建等所用引物采用Primer5.0软件设计,由大连宝生物公司合成,由上海生工公司进行测序,引物序列见表1。