《表1 基因引物序列:Camk 2b低表达对1,4-苯醌致K 562细胞线粒体毒性的影响》

《表1 基因引物序列:Camk 2b低表达对1,4-苯醌致K 562细胞线粒体毒性的影响》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《"Camk 2b低表达对1,4-苯醌致K 562细胞线粒体毒性的影响"》


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选取状态良好的K562细胞,用含有5%(体积分数)血清和0.5%(体积分数)双抗的1640培养基重悬,以每孔3×105个细胞、2 mL培养液接种于6孔板。分别以0、10、20μmol/L 1,4-BQ染毒,每个浓度设置3个平行,培养24 h,收集细胞后加入Trizol提取RNA,引物序列见表1,逆转录(体系为500 ng RNA,20μL 5×PrimeScript RT Master mix,无酶水补充至体系总体积为20μL)后进行荧光定量PCR反应,反应条件为:95℃,30 s;95℃,5 s;60℃,30 s;95℃,15 s;60℃,1 min;95℃,15 s;共40个循环。以β-actin为内参,用2-ΔΔCT法计算Camk2b mRNA的相对表达水平。