《表2 序列扩增所用引物：我国高粱炭疽病症状类型及其病原菌鉴定》

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《我国高粱炭疽病症状类型及其病原菌鉴定》

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将供试菌株转接到PDA培养基上，25℃培养7～10d后，用手术刀直接刮取培养基表面的菌丝体置于2mL离心管中，按照常规方法提取供试菌株DNA，-20℃保存备用。采用ITS和β-tublin引物分别对供试菌株的DNA进行扩增，引物序列、基因位点及反应程序[15-18]等见表2。PCR产物交由北京鼎国生物技术有限公司测序，测序结果用SeqMan(DNA Star Inc.）软件进行拼接整理，并与GenBank中的已知序列进行比对分析，选取与该菌同源性较高的序列及其近缘种序列构建系统发育进化树，结合病菌形态鉴定结果确定病原菌种类。