《表1 鉴定炭疽菌的引物序列》

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《中国茶树炭疽菌属病害研究进展及展望》

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第二，茶树病害病原菌的正确鉴定。无论从有效防治还是基础科学研究来说，准确识别病害病原菌是开展所有工作的前提。从当前已报到的茶树病害研究可以发现，茶树炭疽菌的种名使用较为混乱，错误名称包括Gloeosporium theae-sinensis、Guignar‐dia camelliae、Glomerella camelliae、Colletotrichum theae-sinensis等。根据订正后的名称，炭疽菌造成的叶枯病病原菌为炭疽菌属（或刺盘孢属）Colletot‐richum；座盘孢菌造成的叶枯病病原菌无性态为座盘孢属Discula，有性态未发现。建议在未来描述或鉴定茶树病害病原菌时，采用以下方法进行鉴定：（1）叶片病斑观察记录；（2）单孢分离法分离病原菌并提取优势病原菌DNA；(3）以病原菌DNA为模板，利用PCR技术扩增ITS序列，结合形态特征初步鉴定病菌的属级分类单元；（4）根据病原菌所属属级分类单元成熟的分子标记基因设计引物（表1），分别扩增ACT、TUB2、CAL、GAPDH、GS和CHS-1序列并构建多基因系统发育树，并根据亲缘关系相近的炭疽菌模式种形态特征（表2）明确病原菌。以上方法中的PCR扩增过程，不可仅以ITS序列作为病原菌的鉴定标准。另外，茶树炭疽菌属病原菌多归属于胶孢炭疽菌复合种，可利用PCR技术扩增ApMa和GS基因联合构建系统发育树来快速鉴定真菌种类，但由于该复合种中部分模式种的基因序列并未提交，且该方法还不能有效区分暹罗炭疽菌和田皂角炭疽菌C.aeschynomenes(Sharma et al.，2014；Liu et al.，2015；Wang et al.，2016a），因此，该方法仅适用于快速鉴定茶树常见炭疽菌。