《表1 引物序列及用途：禾谷炭疽菌CgRab5A的亚细胞定位研究》

《禾谷炭疽菌CgRab5A的亚细胞定位研究》

本实验中用到的引物序列如表1所示。其中CgRab5A-PF/PR首先通过在线网站预测CgRab5A的启动子可能在ORF区域上游2700bp左右的位置（Score值为1.084），因此选定ORF上游大概3000bp核苷酸用Primer5设计引物得到CgRab5A-PF/PR，并在其CgRab5A-PF前面加上pKNT XhoI无缝接头序列GGG-TACCGGGCCCCCCCTCGAG，在CgRab5A-PR前面加上GFP的前接头TCCTCGCCCTTGCTCACCAT。GFP片段的扩增引物GFP-F/R则是从GFP序列中起始密码子和去除终止密码子后开始各取20个碱基得到的。CgRab5A片段扩增的前引物CgRab5A-OF是从起始密码子开始取20个碱基，并在前面加上GFP的后接头CACTCACGGCATG-GACGAGCTGTACAAG获得的，而扩增的后引物则是用Primer 5对CgRab5A的ORF和3′端UTR序列进行设计获得，并在CgRab5A-OR前面加上pKNT EcoRI无缝接头CCCCCGGGCTGCAGGAATTC。