《表1 引物及DNA序列:酿酒酵母全基因组SNARE蛋白的亚细胞定位研究》
首先用Stu1-F/R和Snab1-F/R两对引物(表1)为BS-Ura3Kl质粒载体引入Stu I、Sna BI两个酶切位点。分别以酵母基因组及质粒BS-Ura3-GFP-Atg8为模板,通过PCR获得启动子、ORF和GFP的基因片段(引物见表1),并利用Bam HI和Eag I内切酶线性化BS-Ura3Kl质粒载体,然后经过琼脂糖凝胶电泳回收载体核酸片段。将得到的片段同源重组后转入到DH5α感受态细胞,用含有氨苄青霉素(ampicillin)的LB培养平板进行筛选。最后从菌落PCR验证结果为阳性的菌株中提取质粒(表2),并送往Genewiz公司测序。
图表编号 | XD00106175000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.10.01 |
作者 | 张正坦、朱婧、谢志平 |
绘制单位 | 上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室、上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室、上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |