《表1 引物序列:番茄斑萎病毒G_N与西花蓟马互作蛋白的初步筛选》
取大约10 mg曼陀罗叶片按照TRIzol法提取叶片总RNA,用PrimeScriptTM II1st strand cDNA Synthesis Kit反转录试剂盒按照说明书反转成cDNA。设计带In-fusion接头序列的GN基因的引物(表1)。以感染TSWV的曼陀罗叶片cDNA为模板扩增GN基因,胶回收纯化基因片段。用SFi1酶切pBT3-STE载体,酶切产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳后,胶回收纯化载体片段。GN基因连接线性化pBT3-STE载体,转化DH5α感受态细胞,涂布于硫酸卡那霉素抗性LB平板上,挑斑测序。待测序无误后,用小提中量试剂盒提取pBT3-STE-GN质粒,储存于﹣20℃待用。
图表编号 | XD00164755300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.05.26 |
作者 | 郑晓斌、万岩然、张友军、吴青君 |
绘制单位 | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所、河北农业大学植物保护学院、中国农业科学院蔬菜花卉研究所、中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |