《表1 JASPAR预测的人PD-L1基因启动子区STAT3结合元件及其突变序列》

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《人PD-L1基因启动子区STAT3结合元件的筛选》

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生物信息学软件JASPAR预测发现，人PD-L1基因启动子-200～0 nt区域含有2个STAT3结合元件，分别位于启动子内-194～-184 nt和-135～-125 nt处。为了进一步研究上述2个STAT3结合元件对于PD-L1基因启动的调控作用，实验分别构建了-194～-184 nt元件的突变体（pGL3-PD-L1-FL-M1）、-135～-125 nt元件的突变体（p GL3-PD-L1-FL-M2）和上述2个结合元件的联合突变体（pGL3-PD-L1-FL-M3），结合元件的序列和突变后的序列见表1。将上述质粒分别与pCMV-STAT3质粒共转染HEK-293细胞，检测各转染组细胞中荧光素酶活性。结果显示（图5），突变-194～-184 nt和-135～-125 nt元件均可显著下调PD-L1基因启动子的荧光素酶活性，联合突变更为明显（P<0.01）。