《表1 引物序列:水稻类病斑突变体spl41的表型鉴定及生理分析》

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《水稻类病斑突变体spl41的表型鉴定及生理分析》


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在分蘖期,用TRIzol(Invitrogen)试剂提取野生型HHZ和突变体spl41植株叶片总RNA,总RNA的DNase消化使用TURBO DNA-freeTMKit(Ambion)试剂盒,使用Maxima H Minus First Strand c D-NA Synthesis Kit(Thermo Scientific)试剂盒进行反转录。使用LightCycler96(Roche)仪器进行qRT-PCR实验。使用FastStart Essential DNA Green Master(Roche)试剂盒进行qRT-PCR,反应体系严格按照使用说明进行操作,每组样品进行3次实验重复。反应程序为:95℃10 min;95℃10 s,60℃15 s,72℃20 s,共40个循环。使用Primer Premier 5设计qRT-PCR引物(表1),OsUbi5作为内参基因。使用2-△△Ct法分析防卫相关基因在野生型HHZ和突变体spl41中的表达量差异。