《表1 引物序列与用途：芒果翻译起始因子MieIF1A-a基因的克隆与功能分析》

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《芒果翻译起始因子MieIF1A-a基因的克隆与功能分析》

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利用实时荧光定量PCR技术分析MieIF1A-a在不同组织、不同发育阶段果实以及逆境胁迫下的幼苗叶片MieIF1A-a的表达情况，以已公布的MiGAPDH为内参[31]（表1），逆转录cDNA为模板，用SYBR Green I Master kit（Takara）试剂盒，MieIF1A-a荧光定量引物qMieIF1A-a（表1），在Light Cycler?480上对目的基因的表达水平进行检测。PCR反应体系为20μL，包括10μL SYBR Premix ExTaq(0.25μmol/μL），上、下游引物各0.8μL(10μmol/L），2μL cDNA（50 ng/μL），6.4μL去离子水。PCR程序如下：95℃30 s，95℃5 s，60℃20 s，60℃收集荧光信号，45个循环，95℃0 s，65℃15 s，42℃冷却。使用2-ΔΔCT方法[32]计算基因相对定量，每个样品重复3次。