《表1 引物序列:过表达玉米转录因子ZmWRKY101基因提高拟南芥植株的耐盐力》

《表1 引物序列:过表达玉米转录因子ZmWRKY101基因提高拟南芥植株的耐盐力》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《过表达玉米转录因子ZmWRKY101基因提高拟南芥植株的耐盐力》


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依据玉米非生物胁迫的转录组数据(Shan等2013),选取表达差异WRKY转录因子序列,在MaizeGDB (https://maizegdb.org/)中进行同源比对,命名为Zm WRKY101。根据基因序列设计扩增该基因的全长序列的引物(表1)。使用Prime STAR Max DNA Polymerase (Ta Ka Ra,大连,中国)高保真酶对目的基因进行PCR扩增,反应体系为:1.0μL的c DNA模板、25μL的Prime STAR Max Premix (2×)、上下游引物(10μmo L-1)各2.0μL,用dd H2O补至50μL。PCR反应条件:95°C变性10 s,55°C退火5 s,72°C延伸10 s,35个循环。取上述PCR产物在含EB的1.2%琼脂糖凝胶上进行电泳,回收产物与p MD19-T载体(Ta Ka Ra,大连,中国)连接,转入DH5α感受态细胞中,通过蓝白斑筛选,将验证的阳性克隆呈送生工生物工程(上海)股份有限公司测序。