《表1 引物序列:过表达玉米转录因子ZmWRKY101基因提高拟南芥植株的耐盐力》
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《过表达玉米转录因子ZmWRKY101基因提高拟南芥植株的耐盐力》
依据玉米非生物胁迫的转录组数据(Shan等2013),选取表达差异WRKY转录因子序列,在MaizeGDB (https://maizegdb.org/)中进行同源比对,命名为Zm WRKY101。根据基因序列设计扩增该基因的全长序列的引物(表1)。使用Prime STAR Max DNA Polymerase (Ta Ka Ra,大连,中国)高保真酶对目的基因进行PCR扩增,反应体系为:1.0μL的c DNA模板、25μL的Prime STAR Max Premix (2×)、上下游引物(10μmo L-1)各2.0μL,用dd H2O补至50μL。PCR反应条件:95°C变性10 s,55°C退火5 s,72°C延伸10 s,35个循环。取上述PCR产物在含EB的1.2%琼脂糖凝胶上进行电泳,回收产物与p MD19-T载体(Ta Ka Ra,大连,中国)连接,转入DH5α感受态细胞中,通过蓝白斑筛选,将验证的阳性克隆呈送生工生物工程(上海)股份有限公司测序。
图表编号 | XD00229588600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.09.20 |
作者 | 郭玉敏、张云华、井涛、臧小平 |
绘制单位 | 阜阳幼儿师范高等专科学校科学与健康系、安徽农业大学资源与环境学院、安徽农业大学资源与环境学院、中国热带农业科学院海口实验站、中国热带农业科学院海口实验站 |
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