《表1 引物序列:杨树ERF转录因子RAP2L15基因RNAi植物表达载体的构建及遗传转化》

《表1 引物序列:杨树ERF转录因子RAP2L15基因RNAi植物表达载体的构建及遗传转化》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《杨树ERF转录因子RAP2L15基因RNAi植物表达载体的构建及遗传转化》


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提取‘84K杨’叶片的总RNA并反转录成c DNA用于PCR扩增(刘轶等2017)。利用Primer 6.0软件进行引物设计,引物I和II分别用于正向和反向序列的扩增,引物XZ用来鉴定转基因杨树(表1)。具体反应体系如下:2×Fast Pfu Master Mix 10μL,Primer F 1μL,Primer R 1μL,c DNA 1μL,dd H2O 7μL。PCR反应条件如下:94oC预变性3 min;94oC变性30 s;58oC退火1 min;72oC延伸30 s;72oC延伸10min;33个循环;4oC保存。