《表1 实验引物设计:杨树ERF11转录因子基因应答渗透胁迫表达分析》

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《杨树ERF11转录因子基因应答渗透胁迫表达分析》


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利用天恩泽柱式植物RNAout试剂盒提取总RNA,用PrimerScriptTMRT reagent Kit with gDNA E-raser(Perfect Real Time)试剂盒反转录成cDNA。设计引物(见表1),对其克隆,按照扩增反应程序:94℃预变性2 min,94℃变性30 s,56℃退火30s,72℃延伸40 s,35个循环,72℃延伸10 min,4℃保存。1.0%的琼脂糖凝胶电泳回收,与p MD19-T载体连接,42℃热激转化大肠杆菌,挑选阳性克隆送至生工测序,保留测序正确的菌液进行后续实验。