《表1 PCR引物(1):毛竹NIP基因的分子特征及应答胁迫的表达模式》

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《毛竹NIP基因的分子特征及应答胁迫的表达模式》


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(1)小写字母表示保护碱基和酶切位点。The lowercase letters indicate protected bases and restriction sites.

根据基因特征和表达模式分析结果,选择2个基因(Pe NIP1-1和Pe NIP2-2)设计编码区扩增引物(ORF-NIP1-1和ORF-NIP2-2)和酵母表达载体构建引物(BENIP1-1和BENIP2-2)(表1),以毛竹c DNA为模板先扩增编码区,经测序验证正确后,以测序正确的质粒为模板扩增得到包含双酶切位点的基因片段。采用Bam HⅠ和EcoRⅠ双酶切将含有Pe NIP1-1和Pe NIP2-2目的基因的片段分别克隆到p YES2载体的多克隆位点,形成酵母表达载体p YES2∷Pe NIP1-1和p YES2∷Pe NIP2-2。