《表1 毛竹PP2C家族基因的q RT-PCR引物信息》

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《毛竹PP2C基因家族鉴定与表达分析》

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综合毛竹PP2C基因的系统进化分析结果与启动子顺式作用元件预测结果，在9个亚家族中各选取1～2个富含激素响应元件与胁迫相关元件共计11个毛竹PP2C基因用于后续表达检测。利用Primer Premier 5软件设计q RT-PCR引物（表1），由杭州有康生物科技公司合成。以毛竹nucleotide tract-binding protein（NTB)为内参基因（Fan et al.，2013）。PCR反应体系：c DNA 0.5μL，10μmol/L上下游引物各0.4μL，2×SYBR Premix Ex TaqTMⅡ（Ta Ka Ra，大连）5μL，dd H2O 3.7μL。PCR反应程序：95℃预变性3 min；95℃变性10 s，60℃退火20s，72℃延伸20 s，40个循环。每个反应设定3个重复。实验仪器为CFX96TM Real-Time PCR Detec‐tion System (Bio-Rad，美国）。相对定量计算采用2-ΔΔCt方法。