《表1 基因q RT-PCR引物序列》

《表1 基因q RT-PCR引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《基于转录组测序探究PM2.5损伤肺上皮细胞BEAS-2B的相关机制》


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收集对照组和PM2.5组细胞并提取总RNA,逆转录后进行实时荧光定量PCR实验。使用Primer-BLAST,根据转录组相关基因的序列设计基因特异性引物(表1)。目的基因包括核转录因子激活蛋白-1转录因子亚单位(FOSB、FOSL1)、基质金属肽酶1(MMP1)、集落刺激因子2(CSF2)、白细胞介素-6(IL-6)和黏蛋白5AC(MUC5AC)。将提取的RNA逆转录为cDNA后依据SYBR Green PCR Master Mix试剂盒说明书取2μL cDNA进行实时荧光定量反应。反应条件:95℃5 min;95℃10 s,58℃30 s,40次循环。在实验中以Actin为内参照。用2-ΔΔCt法计算相对表达量,并与RNA-seq测序后相关基因表达量进行比较。