《表1 q RT-PCR引物序列》

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《苦参总碱抗表皮葡萄球菌的作用机制研究》


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使用无菌TSB培养基培养表皮葡萄球菌至对数生长中期,设置实验组(TSB培养基溶解并稀释苦参总碱药液,质量浓度分别为5、10、15 mg/m L)、阴性对照组(不含苦参总碱药液的TSB培养基),将细菌菌液分别用实验组和对照组的培养基以1∶1 000比例稀释,置于37℃恒温培养箱中培养8 h,收集细菌菌液,提取总RNA,参照RNeasy mini kit(Qiagen)试剂盒步骤操作,将总RNA逆转录成c DNA,参照Prime Script?RT reagent Kit(Takara)试剂盒步骤操作,使用q RT-PCR法(参照THUNDERBIRD SYBR q RT-PCR试剂盒步骤操作)检测苦参总碱作用前后相关基因转录水平变化。引物序列见表1,其中内参基因为gyr B,目的基因为serp2195、gpx A-2[20]。