《表1 q RT-PCR引物序列》

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《前列腺癌非编码RNA1在鼻咽癌中的表达和预后的关系》


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利用实时定量PCR(quantitative reverse transcription-PCR,qRT-PCR)检测组织中LncRNA PRNCR1表达水平。利用Trizol法提取总RNA(购自美国Thermo Fisher Scientific公司),检测合格后,利用反转录试剂盒(购自美国Applied Biosystens公司)反转录,后经qRT-PCR检测,操作严格按照qRT-PCR试剂盒(购自美国Applied Biosystens公司)说明进行。内参基因为β-actin基因,qRT-PCR反应体系如下:SYBR Select Master Mix(2×)5 μl,cDNA 1 μl,正向引物0.4 μl,反向引物0.4 μl,ddH2O为3.2 μl。反应条件如下:预热变性95℃,3分钟;95℃,15秒,退火延伸60℃,60秒,40个循环。引物交由上海生工生物工程公司合成,引物序列(表1)。LncRNA PRNCR1相对表达量根据2-??CT法计算。