《表1 q RT-PCR引物序列》

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《天麻改善小鼠睡眠作用及其机制研究》

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利用相关软件设计qRT-PCR引物并利用NCBI的Primer Blast功能验证引物特异性，引物序列见表1。连续给药20 d，测定小鼠各项睡眠指标后颈椎脱臼法处死小鼠并取全脑匀浆，称取全脑匀浆约0.1 g，用1 mL Trizol裂解，提取总RNA并及时反转录成c DNA用于qRT-PCR。以c DNA为模板配制成20μL的反应体系，使用Roche Light Cycler96实时荧光定量PCR仪进行测定，具体反应条件为:95℃、10 min预变性，95℃、10 s，60℃、10 s，72℃、15 s，共40个循环。采用2-ΔΔCt法计算实验组各基因的相对表达水平。