《表1 q RT-PCR引物序列》

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《玉米泛素结合酶基因家族的生物信息学及表达分析》


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为了解玉米E2基因在植物组织中的表达模式,以系统发育进化树中的XVIII亚家族玉米E2基因为对象,根据其基因序列,利用Primer Premier 5.0设计qRT-PCR引物(表1),分别以对照组和处理组不同时间点的玉米根和叶的cDNA为模板进行qRT-PCR检测,以β-Actin基因为内参,其引物见表1。反应体系10.0μL:SYBR Premix Ex Taq IITM混合液5.0μL,10μmol/L上、下游引物各1.0μL,cDNA模板1.0μL,ddH2O补足至10.0μL。扩增程序:94℃预变性30 s;94℃30 s,58℃20 s,72℃40 s,进行40个循环,每份待测样品设3个重复,利用2-ΔΔCt计算相对表达量。