《表1 q RT-PCR引物序列》

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《棉花GhJAZ10基因的克隆及其对干旱胁迫的响应》


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Gh:陆地棉;At:拟南芥;His:组蛋白基因;DREB:干旱响应元件结合蛋白基因;RD22:干旱响应基因22;ABF4:脱落酸响应元件结合因子4基因;Actin:肌动蛋白基因

棉花根、茎、叶、花、种子、萼片、雄蕊、雌蕊、胚珠、纤维组织和12%PEG6000胁迫处理0、0.5、1、3、6和12 h的根、茎和叶组织,以液氮研磨至粉末状;参照1.2.1方法提取总RNA并反转录合成cDNA,对GhJAZ10表达量进行分析。反应在7900HT Fast Real-time PCR System(Applied Biosystems,美国)上进行。PCR反应体系:TB Green Premix Ex Taq10μL,ROX Reference Dye 0.4μL,cDNA(1000 ng/μL)2μL,10μmol/L正反向引物(表1)各0.4μL,以ddH2O补足至20μL。反应程序为:95℃30 s;95℃5 s,60℃30 s,40个循环。以GhHis3(histone h3.3)为棉花的内参基因,以AtActin2为拟南芥的内参基因。采用2-ΔΔCt算法分析数据(Livak,Schmittgen,2001)。