《表1 q RT-PCR引物序列》
使用不同浓度,即0.5、2.0、6μmol/L顺铂处理Hep AD38细胞,对照组用PBS处理,72 h后,胰酶消化细胞后制备单细胞悬液,计数,离心去上清,CPLB裂解液(10 mmol/LTris-Hcl,1 mmol/L EDTA,1%NP-40,2%蔗糖)裂解细胞,13 000 g离心5 min后取上清,微管酶37℃消化1 h,13 000 g离心5 min后取上清,35%PEG8000冰上沉淀上清中的病毒颗粒1 h,蛋白酶K消化过夜后酚/氯仿抽提,乙醇沉淀获得HBV复制中间体。选取p CH9/3091质粒作为标准品,Real-time PCR方法对提取的HBV复制中间体进行定量检测。反应条件为95℃10 min,39个循坏(95℃20 s,58℃15 s,72℃10 s,75℃1 s),溶解曲线:50℃1 s,99℃1 min。序列见表1。本实验重复3次。
图表编号 | XD00229353900 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.09.28 |
作者 | 陈雪梅、胡杰、潘娥、梁利、汪凯、黄爱龙、唐霓 |
绘制单位 | 重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室、重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室、重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室、重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室、重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室、重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室、重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室 |
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