《表1 q RT-PCR引物序列》

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《棉花CML基因家族成员鉴定与功能分析》

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利用天根RNA试剂盒提取总RNA，并用Promega反转录试剂盒合成第1链cDNA。使用NCBI primer-BLAST设计qRT-PCR引物（表1）。试验采用SYBR染料法，基于ABI 7500 fast平台。体系为20μL，包含10μL SYBR Green PCR mix，上下游引物各0.5μL，2μL的稀释c DNA模板及7μL ddH2O。qRT-PCR反应程序为:95℃10 min；循环阶段:95℃5 s，60℃30 s，72℃30 s，40个循环；熔解曲线阶段:95℃15 s，60℃1 min，95℃30 s，60℃15 s。以Actin作为内参基因，采用2-△△CT方法计算基因的相对表达量，每个基因的表达反应重复3次。