《表1 q RT-PCR引物序列》

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《血清微小RNA34a联合癌胚抗原、糖链抗原72-4预测胃癌根治术后早期复发转移》

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1.血清miR-34a表达水平的检测：取部分血清，采用miRNeasy Mini提取试剂盒（德国Qiagen公司生产）提取血清总RNA。检测其纯度及完整性良好后，以One-step qRT-PCR Kit试剂盒（东洋纺公司）将总RNA反转录为cNDA，操作严格按照说明书进行；采用宝生物公司生产的SYBR Green PCR master mix试剂加配实时荧光定量PCR(qRT-PCR）反应体系。引物由北京六合华大基因科技有限公司合成（表1）。每个样品设置3次生物学重复。体系加配完成后，置于Bio-Rad荧光定量PCR仪进行反应，对所得数据进行分析。以U6为内参基因，采用2-ΔΔCt算法计算miR-34a相对表达量。