《表1 用于黑籽南瓜NBS类抗病基因的q RT-PCR检测引物序列》

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《黑籽南瓜NBS类抗病基因的鉴别及关键基因分析》


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用Primer 5.0软件设计Cf NBS类关键基因和引物(表1)。q RT-PCR采用CHam Q q RT-PCR Master Mix试剂盒,反应体系(10μL)为:2×super Real Premixture 5μL,上下游引物(10μmol·L-1)各0.2μL,c DNA 1μL,dd H2O 3.6μL。q RT-PCR反应程序为:95°C预变性5 min;95°C变性10 s,60°C退火15 s,72°C延伸20 s,40个循环。每个反应进行3次重复。以β-actin为内参基因。