《表1 用于q RT-PCR分析的引物序列》

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《辣椒属GRF基因家族全基因组鉴定和表达分析》

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基因特异的q RT-PCR引物通过IDT网站（https：//sg.idtdna.com/Scitools/Applications/Real Time PCR/）在线设计，并使用NCBI Primer BLAST检验引物特异性。Wan等（2011）研究证明beta-tubulin在辣椒不同组织、激素和非生物胁迫处理条件下表达最稳定，是辣椒q RT-PCR试验最理想的内参基因。GRF基因和beta-tubulin引物列于表1。按照说明书使用SYBR?Premix Ex Taq (Ta Ka Ra，日本）配置反应体系，利用ABI 7500(Thermo Scientific，美国）进行荧光定量PCR反应。PCR混合物终体积为20μL，包括10μL SYBR Green Master mix，7.8μL dd H2O，0.4μL DyeⅡ，1μL c DNA和正反向引物各0.4μL(2 mmol·L-1）。PCR反应程序为：95℃30 s，95℃5 s，60℃34 s，40个循环。每个检测重复3次。Ca GRF基因相对表达水平用2-ΔΔCT法进行计算（Livak&Schmittgen，2001），用Origin8.0软件进行t测验，用Graphpad Prism 8软件作图。