《表1 用于分析mRNA和circRNA水平的q RT-PCR引物》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者环状RNA差异性表达分析》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

定量逆转录PCR验证法使用PrimeScript RT试剂盒（Takara Bio，Nojihigashi，Kusatsu，Japan），按照制造商说明进行逆转录生产互补DNA。采用定量PCR SYBR Green Master Mix（Takara，Tokyo，Japan）在ViiA 7 qRT-PCR系统（Applied Biosystems Inc.，Foster City，CA，USA）中检测circRNA的表达。所有指标均按以下程序进行：95℃10 min；40个PCR循环[95℃10 s，60℃60 s（收集荧光）]。为建立PCR产物的熔解曲线，扩增反应结束后，95℃10 s；60℃60 s；95℃15 s，并从60℃缓慢加热至99℃（仪器自动进行Ramp Rate为0.05℃/s）。采用2-ΔΔCt方法计算RNA相对表达量。所有引物均由Sangon Biotech(Shanghai，China）合成。所有定量PCR反应均为1式3份。PCR扩增曲线基线平滑，指数扩增期明显，直到平台期，副孔之间平行性较好，说明PCR扩增良好；溶解曲线为单峰，无杂峰，说明扩增产物具有特异性，无其他非特异性产物存在。（表1）