《表1 q RT-PCR技术检测Lin28A和Lin28B的引物序列》

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《子宫腺肌病子宫内膜-肌层交界区平滑肌细胞中Lin28表达及对细胞增殖影响研究》

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应用RNA提取试剂盒（日本Toyobo公司）提取细胞总RNA，以10μL体系反转录合成c DNA，并进行PCR反应扩增。Lin28A和Lin28B及内参照3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）基因序列通过Gene Bank获得。引物设计和合成由上海生工生物科技有限公司完成，引物序列见表1。qRT-PCR反应采用7500 Real Time PCR仪（美国ABI公司），扩增反应采用三复孔。PCR扩增参数：95℃、10min，1个循环；94℃、30s，55℃、60s，72℃、30s，共40个循环。生成定量标准曲线图，计算机软件分析循环阈值（Ct值），△△Ct法计算m RNA的相对表达量。计算Lin28B抑制率，公式为：（1-干扰组Lin28B m RNA相对表达量/对照组Lin28B m RNA相对表达量）×100%。并筛选出抑制率最佳的Lin28B si RNA。