《表1 PCR引物(1):毛竹微管蛋白的分子特征及PeTUA3的功能》

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《毛竹微管蛋白的分子特征及PeTUA3的功能》


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(1)引物中的小写字母表示酶切位点。The small letters indicate the sites of restriction enzymes in primers.

根据获得的毛竹PeTUA3基因(FP100535.1)CDS序列,设计编码区引物(ORF-TUA3)(表1),以毛竹cDNA为模板进行PCR扩增。反应程序:95℃5 min;95℃1 min,60℃1 min,72℃1 min 40 s,35个循环;72℃延伸10 min,4℃保存。PCR产物经电泳后用胶回收试剂盒(Biomiga,中国)回收,并连接到pGEM-T easy(Promega,美国)载体上,热激转化大肠杆菌(Escherichia coli)感受态细胞(DH5α),筛选抗性克隆,提取质粒并酶切验证,同时送生工生物工程技术服务有限公司测序。