《表1 PCR引物：抗金黄色葡萄球菌富丝氨酸重复蛋白SraP_(L-Lectin)抗体在小鼠巨噬细胞抗感染中的功能研究》

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《抗金黄色葡萄球菌富丝氨酸重复蛋白SraP_(L-Lectin)抗体在小鼠巨噬细胞抗感染中的功能研究》

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针对金黄色葡萄球菌SraP的4个截短类型（SraP90-751、SraP245-751、SraP245-572、SraP245-492）的相应核酸序列，以USA300 LAC基因组为模板分别设计引物（表1），PCR扩增后，分别克隆至p ET28a，经DH5α扩增、抽提质粒并测序正确后，转化入表达菌BL21，37℃，200 r/min摇床培养至D（600 nm）为0.8，加入0.1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷（isopropylβ-D-thiogalactoside，IPTG）25℃诱导过夜（表达过程中培养基均含有卡那霉素），4 000 r/min离心20 min收集菌体，PBS洗1遍，PBS重悬超声处理后，4℃12 000 g离心10 min收集上清，0.22μm滤膜过滤后，利用镍柱亲和层析纯化重组His标签蛋白。