《表1 PCR引物：R-Spondin2、Syndecan-1在小鼠肝星状细胞活化中的作用研究》

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《R-Spondin2、Syndecan-1在小鼠肝星状细胞活化中的作用研究》

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采用RT-PCR法。PCR引物由上海齐合生物工程技术有限公司合成，见表1。Trizol法提取HSC总RNA，-80°C保存。紫外分光光度计测定260 nm和280 nm波长处的吸光度值，计算提取的总RNA浓度。用逆转录试剂盒逆转录合成cDNA，-20℃保存。PCR体系:SYBR试剂10μl，浓度10μmol/L的上、下游引物各0.5μl，样品cDNA 2μl，双蒸水7μl。PCR条件:95℃4min；95℃30s，60℃45s，72℃1 min，共35个循环；72°C延伸5 min。用SDS软件进行数据分析，用比较Ct值（循环阈值）的方法分析结果，目的mRNA的相对表达水平由GAPDH进行标准化。