《表1 油体蛋白基因及脂肪酸合成转录因子表达水平检测的引物信息》

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《油菜种子发育早期的油体发生与调控》


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将油菜授粉后9~35 d的胚在解剖镜下手工分离,按授粉后不同天数分为6组,分别为:授粉后9~11 d(9~11 DAP,球形胚时期)、12~13 d(12~13 DAP,心形胚时期)、14~15 d(14~15 DAP,鱼雷形胚时期)、16~18 d(16~18 DAP,拐杖胚时期)、19~24 d(19~24 DAP,弯子叶胚时期)和25~35 d(25~35 DAP,绿色子叶胚时期)。采用Trizol法提取总RNA,并反转录成cDNA,参照SsoAdvanced SYBR Green supermix使用说明书,以油菜actin2(Bn ACT2)基因为内参,采用CFX connect real-time PCR detection system(Bio-Rad,USA)进行检测(表1)。每个基因都设其在球形胚时期表达量为“1”,计算其在其他时期的相对表达量。利用SPSS14软件进行数据统计和分析,采用Photoshop CS2、Image J和Corel Draw X4软件作图。