《表2 基因敲除相关引物:Homeobox转录因子对黄曲霉生长和毒素合成的影响》

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《Homeobox转录因子对黄曲霉生长和毒素合成的影响》


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从Fungi DB数据库(http://fungidb.org/fungidb/)获取黄曲霉待敲除homeobox基因的序列(含其上下游2 000bp的DNA序列),通过Primer premier5.0设计目的基因同源臂A、B片段的引物。同时于A片段的3’端和B片段的5’端设计巢氏引物,通过重叠延伸PCR反应扩增包含同源臂A、B与AfpyrG 3个基因片段。用构建好的连接产物转化黄曲霉原生质体,根据同源重组的原理获得重组子,挑取转化后单菌落接种到YES培养基上培养并进行PCR验证,鉴定转化成功的重组子,具体方法参照Yang et al.(2019)的报道。本研究所用引物见表2。