《表1 引物序列：油茶低磷响应转录因子CoPHR1、CoPHR2基因的克隆与表达分析》

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《油茶低磷响应转录因子CoPHR1、CoPHR2基因的克隆与表达分析》

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根据序列特异性，设计CoPHR1、CoPHR2基因的qRT-PCR引物，以油茶GAPDH作为内参基因（表1）；提取处理材料RNA，后期反转录为c DNA，以此作为实时荧光定量的模板；该实验进行前，需对扩增片段进行回收、测序验证序列真伪。qPCR使用仪器为CFX96TM Real-time PCR反应系统（BIO-RAD，美国）；该反应总体系为20μL:10.0μL的2×T5 Fast qPCR Mix，6.4μL去RNA酶水，上下游引物各0.8μL，2.0μL模板；试剂采用的是2×T5 Fast qPCR Mix（SYBR Green I）；qPCR反应程序:95°C预变性30 s；95°C变性5 s，55°C退火30 s，进行40个循环。每个反应重复3次，qPCR数据的分析采用2-ΔΔCt的方法（Livak等2001）。