《表1 引物汇总:罗汉果生长素响应因子SgA RF8基因的克隆及表达分析》

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《罗汉果生长素响应因子SgA RF8基因的克隆及表达分析》


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基于已报道的罗汉果内参基因筛选情况,选定肌动蛋白Actin作为实时荧光定量的内参基因(郭茜茜等,2014;涂冬萍等,2015)。根据黄瓜等罗汉果近缘物种的Actin序列,设计一对简并引物Actin-JF和Actin-JR,采用同源克隆方法,以罗汉果混合样反转录c DNA第一链为模板进行RT-PCR扩增,克隆罗汉果内参基因Sg ACTIN,扩增序列为Actin基因的部分序列。将目的条带回收后经TA克隆蓝白斑筛选后送公司测序。PCR反应体系及程序参照引物汇总(表1),其中RTP3和S3序列参考莫燕梅等(2016)的引物信息。