《表1 试验用PCR引物:小麦NF-Y型转录因子基因TaNF-YC1介导烟草植株抵御渗透协迫功能研究》

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《小麦NF-Y型转录因子基因TaNF-YC1介导烟草植株抵御渗透协迫功能研究》


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以小麦品种‘石麦22’为材料,参照本实验室建立的方法,用MS营养液水培小麦幼苗。三叶期时,在营养液内补充5%聚乙二醇(PEG-6000)和200 mmol/L Na Cl进行干旱和盐分处理。处理1、3、9和27 h后收获根系样本,研究Ta NF-YC1应答渗透胁迫的表达模式;为揭示供试基因对恢复处理的响应,将部分经27 h渗透胁迫处理的幼苗转入正常MS营养液进行恢复处理,处理后1、3、9和27 h收获根系样本。以渗透胁迫处理前(0 h)根系作对照。采用TRIzol试剂提取样本总RNA,采用反转录酶M-MLV进行样本m RNA反转录合成c DNA。参照Guo等的方法[15],鉴定各样本Ta NF-YC1转录本数量,扩增引物见表1。以小麦组成型表达基因Tatubulin作为均一化目标基因转录本内标,扩增该内标基因引物见表1。各处理下目标基因和内标转录本检测均进行3次重复。