《表1 定量PCR引物:过表达SbRFP1基因提高马铃薯组培苗的耐盐性》
为了明确SbRFP1在提高马铃薯组培苗耐盐胁迫过程中的作用方式,检测转录组中7个差异表达基因在各胁迫处理的组培苗中的表达模式。马铃薯组培苗RNA提取(2019年3月10日)采用PLANT pure通用植物总RNA快速提取试剂盒(Aidlab,RN33),cDNA第一链的合成参照PrimeScriptTMⅡ1st Strand cDNA Synthesis Kit(TaKaRa,RR047A)使用说明书。荧光定量qPCR(2019年3月12日)参照TaKaRa公司SYBR?Premix Ex TaqTMⅡ(perfect Real Time)说明书,在Bio-Rad IQ5 Real-time PCR Detection System(Bio-Rad Laboratories,Hercules,CA)上进行PCR反应。20μL反应体系:1μL cDNA,正反向引物(10μmol·L-1)各1μL,10μL 2×SYBR?Premix Ex TaqTM,7μL nuclease-free H2O。反应程序:95℃30 s,95℃5 s,56℃30 s,72℃30 s;40个循环。结果采用2-ΔΔCt法(Livak&Schmittgen,2011)进行分析。引物信息见表1。
图表编号 | XD00142422100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.02.25 |
作者 | 赵喜娟、张会灵、侯娟、张菊平、陈苏丹、宋波涛 |
绘制单位 | 河南科技大学林学院、华中农业大学园艺林学学院、河南科技大学林学院、华中农业大学园艺林学学院、河南农业大学园艺学院、河南科技大学林学院、河南科技大学林学院、华中农业大学园艺林学学院 |
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