《表1 引物序列:异源过表达水稻OsSAPP3基因促进拟南芥叶片衰老》

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《异源过表达水稻OsSAPP3基因促进拟南芥叶片衰老》


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设计引物(表1)扩增OsSAPP3的CDS序列,分别在上游引物CDSOsSAPP3-F和cGVG-SAPP3-F中引入Sma I和Sal I的酶切位点;分别在下游引物CDSOsSAPP3-R和cGVG-SAPP3-R中引入Sac I和Cla I的酶切位点。以水稻(Oryza sativa L.)(沈农9816) cDNA为模板,用高保真聚合酶进行PCR反应,克隆产物长度为1 182 bp,然后将PCR产物分别连入T载体(pGEM-T Easy Vector),完成TA克隆;将所获得的TA克隆分别与pBI121基本载体以及pTA7002载体用Sma I/Sac I以及Xho I/Cla I进行双酶切,分别回收小片段和载体片段,连接后完成35S-OsSAPP3双元表达载体以及GVG-OsSAPP3双元表达载体的构建。