《表1 引物序列：拟南芥AtUNE12基因的耐盐功能初探》

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《拟南芥AtUNE12基因的耐盐功能初探》

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利用Primer Premier 5.0设计引物pROKⅡ-At UNE12-F和pROKⅡ-At UNE12-R（表1），引入SmaⅠ酶切位点，用SmaⅠ（NEB）线性化pROKⅡ载体质粒，将克隆获得的At UNE12基因与线性化pROKⅡ载体进行同源融合（Infusion），转化大肠杆菌并测序验证，结果与原序列比对正确之后提取重组pROKⅡ-At UNE12载体质粒，将其转入EHA105农杆菌中，利用浸花法[29]获得转基因拟南芥。对转基因拟南芥进行DNA提取[30]，用pROKⅡ载体引物进行PCR，电泳检验，并通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术进行检测，利用2-ΔΔCt法进行基因的相对表达量分析[31]，最终获得T3代转基因拟南芥。