《表1 引物列表：耐盐转基因大豆事件FA8015旁侧序列分离及定性PCR检测》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《耐盐转基因大豆事件FA8015旁侧序列分离及定性PCR检测》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

根据1.4序列分析结果，初步获得转基因事件FA8015外源T-DNA整合位点及其左、右侧旁侧序列，设计PCR检测引物FA8015LB-F/FA8015LB-R，FA8015RB-F/FA8015RB-R（表1），使扩增产物包含部分大豆基因组序列和T-DNA片段。以FA8015基因组DNA为模板，利用上述引物分别进行PCR扩增。PCR反应在25μL体系中进行:2×PCR Mix（AS111，TransGen Biotech，北京），1μL正向/反向引物（10μm·L-1），100 ng基因组DNA。反应条件为:95℃预变性5 min，95℃变性30 s，58℃退火30s，72℃延伸3 min，35个循环，72℃延伸10 min。PCR产物于1%琼脂糖凝胶上检测，然后委托生工生物工程（上海）有限公司测序（http://www.sangon.com/），测序所得序列与外源T-DNA和参考基因组序列比对，最终获得转基因大豆事件FA8015外源T-DNA片段左边界和右边界旁侧序列。