《表1 qRT-PCR法各基因引物序列表》

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《抑制细胞周期蛋白依赖性激酶8表达对小鼠胰岛β细胞增殖及胰岛素分泌功能的影响观察》

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采用荧光定量PCR法。取各组细胞，根据TRIpureReagent试剂说明提取总RNA，核酸蛋白检测仪Nanodrop测定RNA浓度和纯度。按照Prime ScriptTM RT reagent Kit说明书进行逆转录操作获得cDNA，根据SYBR Premix Ex TaqTMⅡ说明书进行扩增。反应体系为:上游引物1μL、下游引物1μL、c DNA 2μL、SYBR Premix Ex TaqⅡ12.5μL、无酶水补足25μL。扩增条件:95℃3 min，95℃30 s，60℃30 s，65℃45s，40个循环。以GAPDH作为内参，以2-ΔΔCt代表目的mRNA相对表达量。引物由上海吉满生物科技有限公司合成，具体引物序列见表1。