《表1 qRT-PCR各基因引物序列》

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《缺氧条件下大鼠髓核细胞中缺氧诱导因子1α与自噬相关分子的表达及相关性分析》


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各组细胞用无菌PBS冲洗3次,每孔加入200μL预冷TRIzol试剂以提取髓核细胞总RNA,–80℃保存备用。取适量总RNA,参照逆转录试剂盒说明进行qRT-PCR反应。反应条件:95℃、10 min预变性;95℃、15 s,60℃、1 min,40个循环;65℃、5 s;95℃、0.5 s。各引物序列由广州锐博生物科技有限公司合成,见表1。采用2-ΔΔCt法检测各目的基因相对表达量,以β-actin作为内参,其中LC3B mRNA相对表达量以LC3-Ⅱ表示。