《表1 引物序列:拟南芥开花基因FT对根毛生长的影响研究》

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《拟南芥开花基因FT对根毛生长的影响研究》


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利用Primer 5.0软件设计特异性引物(表1),以野生型拟南芥cDNA为模板,进行PCR克隆扩增,获得目的基因片段,通过In-Fusion连接方法构建pCAMBIA2300-FT-GFP融合表达载体.测序正确后转入农杆菌Ag10,将重组质粒通过农杆菌介导法浸花蕾转入拟南芥,约3~4周收取成熟的种子进行筛选.将种子消毒灭菌后均匀地点在含有浓度为50μg/mL卡那霉素的1/2 MS培养基上,水平放置在22℃长日照恒温培养箱内,不含有转基因的幼苗将会变黄死去,绿色的转基因阳性幼苗T0代则移栽到培养土里.重复筛选最终获得T3代纯合转基因过表达植株.