《表1 引物及引物序列：NaCl胁迫对胡麻种子萌发、幼苗生长及Na~+/H~+逆向转运蛋白基因表达的影响》

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《NaCl胁迫对胡麻种子萌发、幼苗生长及Na~+/H~+逆向转运蛋白基因表达的影响》

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由于200 mmol/L NaCl胁迫下胡麻幼苗生长受到严重抑制，无法长出子叶，因此本研究利用荧光定量PCR法检测了0、50、100、150 mmol/L NaCl胁迫下萌发第8 d胡麻幼苗叶片和根中NHX基因的相对表达情况。各处理组随机挑选10株幼苗用无菌去离子水冲洗3次后控干表面水分，用TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extraction Kit（TaKaRa公司）提取各组样品的总RNA，用PrimeScriptTM1st Strand cDNA Synthesis Kit（TaKaRa公司）进行反转录合成c DNA第1条链。选用文献报道的亚麻NHX基因[17]及亚麻β-Actin内参基因[18]的引物，引物序列见表1，由上海生工生物工程有限公司合成。利用CFX96 RealTime Detection System进行PCR扩增，设置反应体系为20μL，其中cDNA模板2μL，2×TB Green Premix Ex Taq 10μL，10μmol/L上、下游引物各0.5μL，ddH2O 7μL。扩增程序:95℃预变性30s；95℃5 s，60℃30 s，40个循环。根据测得的Ct值，采用2-ΔΔCt方法[19]计算目的基因NHX的相对表达量。每个样品做3次重复。