《表1 引物序列列表:CiNAC071负调控拟南芥耐盐性及其激素响应分析》

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《CiNAC071负调控拟南芥耐盐性及其激素响应分析》


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采用Genome Walking试剂盒(TaKaRa,日本)扩增CiNAC071基因的启动子。根据基因开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,设计启动子扩增特异引物SP1、SP2和SP3(表1)。第一轮扩增未获得理想长度的序列,可进行第二轮扩增,两次扩增的序列拼接起来是该基因的启动子序列。同时,以拼接结果设计克隆启动子全长的引物p071-sense和p071-anti,以中间锦鸡儿gDNA为模板,退火温度56°C,延伸时间2 min 20 s,扩增CiNAC071启动子序列。启动子序列经PlantCARE在线预测分析。