《表1 引物列表:野生大豆AP2/RAV亚家族转录因子GsRAV3负调控拟南芥对ABA的敏感性》

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《野生大豆AP2/RAV亚家族转录因子GsRAV3负调控拟南芥对ABA的敏感性》


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根据目的基因序列设计引物(见表1),构建酵母表达载体pGBKT7-BD,以p GBKT7-BD空载体为阴性对照,pGBKT7-AtDREB为阳性对照。将测序正确含目的基因的重组载体、p GBKT7-BD空载体及pGBKT7-AtDREB分别转化至酵母AH109中。转化方法为TE-LiAC法,操作流程详见Clotech说明书。酵母菌AH109报告基因为HIS3及lacZ。为检测报告基因HIS3表达,将含不同质粒酵母菌置于SD/-Trp/-His双缺培养基上生长;为检测报告基因lacZ表达,采用菌落转移滤纸试验定性检测β-半乳糖苷酶活性,操作流程详见Clotech说明书。