《表1 引物序列：异源表达古菌TRAM基因增强水稻的耐旱性》

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《异源表达古菌TRAM基因增强水稻的耐旱性》

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取生长14 d的新鲜水稻叶片，迅速加入液氮研磨，使用TRNzol提取试剂盒（天根公司）提取总RNA。RNA样品反转录采用Maxima H Minus First Strand cDNA合成试剂盒（Thermo公司）。半定量PCR引物设计（表1）位于检测基因的3?端。PCR反应前先将反转产物稀释5倍，半定量PCR反应体系为10×Taq缓冲液2.5μL，dNTPs 2μL，正向及反向引物（10μmol/L）各1μL，cDNA稀释产物5μL，Taq酶0.5μL，ddH2O补足至25μL。半定量PCR反应条件为:95℃3 min；95℃30 s，60℃30 s，72℃30 s，28个循环；72℃3 min。以水稻Actin1基因表达作为内参。