《表2 BiFC实验所用的农杆菌组合携带的基因》

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《小麦翻译控制肿瘤蛋白TCTP与蔗糖非酵解型蛋白激酶SnRK1的相互作用》

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采用瞬时表达法，将携带有相互作用蛋白基因的质粒在烟草叶片中表达[29]。对分别携带有pSPYNE-TaTCTP、pSPYCE-TaTCTP、pSPYNE-TaSnRK1和pSPYCE-TaSnRK1质粒的农杆菌GV3101进行单克隆培养，OD600值约为0.8时，5 000×g离心3 min后富集菌体，所得菌体用无菌水洗涤，再用烟草侵染缓冲液（9.76 g/L MES、0.76 g/L Na3PO4·12H2O、5 g/L葡萄糖、0.1 mmol/L AS）重悬菌体。将携带有pSPYNE和pSPYCE的农杆菌按照表2的组合混合，例如:第1组为pSPYNE和pSPYCE-TaTCTP混合，第5组为pSPYNE-TaTCTP和pSPYCE-TaSnRK1混合，两种菌液的混合比例为1∶1，并在烟草叶片下表皮注射。48 h后取烟草叶片，使用激光扫描共聚焦显微镜（FV1000，奥林巴斯）在488 nm观察并照相。